封闭负压引流对兔糖尿病溃疡创面组织愈合影响的观察

目的:探讨封闭负压引流(VAC)对兔糖尿病溃疡创面组织愈合的影响及其可能机制。方法:采用四氧嘧啶法建立兔糖尿病溃疡模型,设空白对照组和实验组(对照组创面采用常规包扎治疗处理,实验组创面则采用VAC处理),观察和比较两组动物的创面肉眼观、愈合时间,在致伤前、致伤后3 d、7 d、14 d取创面软组织,检测和比较两组动物的创面组织含水量、血流量以及血浆ET-1和NO含量。结果:与对照组比较,实验组动物的创面肿胀及分泌物得到明显控制,创面坏死组织的清除与肉芽组织的生长明显加快,平均愈合时间明显缩短(P0.05);致伤后3 d、7 d和14 d,创面组织含水量与血浆ET-1含量明显下降(P0.05),创面组织血流量与血浆NO含量明显增加(P0.05)。结论:VAC对兔糖尿病溃疡创面组织的愈合可起到积极的促进作用,这可能与其增加血浆NO含量及降低ET-1的含量有关,其具体机制尚有待于进一步的研究。     

波动性高糖对乳鼠心肌细胞肥大的影响

目的 探讨波动性糖环境对体外培养的乳鼠心肌细胞肥大的影响.方法 取出生后2天SD大鼠乳鼠心脏,采用胶原酶消化法获取心肌细胞,进行心肌细胞原代培养.常规培养心肌细胞72h,待细胞搏动良好,将其随机分为3组:①对照组:给予稳定的糖浓度(5.5mmol/L);②高糖组:给予稳定高糖浓度(25.5mmol/L);③波动性糖组:波动性糖浓度为5.5mmol/L和25.5mmol/L,每12h交替,其他培养条件保持一致.Bradford法检测各组细胞总蛋白质含量;计算机细胞图像分析系统测量单个细胞的体积;采用3H-亮氨酸掺入法,用液闪仪测定心肌细胞蛋白质合成速率.结果 1.高糖组和波动性糖组与对照组相比心肌细胞蛋白含量均增加,波动性糖组与高糖组相比二者增加的数值相近.2.高糖组和波动性糖组与对照组相比心肌细胞体积均有明显增加.3.高糖组与波动性糖组与对照组相比均有蛋白合成的增加.波动性糖组与高糖组相比没有显著性差异.结论 波动性糖有促进心肌细胞肥大的作用,其作用强度与单纯性高糖相仿.在糖尿病心肌病中,波动性糖也是引起心肌细胞肥大、心肌顺应性下降的原因之一.提示临床治疗糖尿病患者时,除了要控制血糖防止血糖过高,而且还要保持血糖的稳定,减少血糖波动所导致的心肌损害.     

普罗布考对糖尿病大鼠肾组织氧化应激的影响

目的研究普罗布考（Probucol）对糖尿病大鼠肾组织氧化应激的影响。方法采用腹腔注射链脲佐菌素（STZ）建立糖尿病大鼠模型。30只Wistar大鼠分为正常对照组（NC）、糖尿病组（DM）、糖尿病普罗布考治疗组（DP）。8周末称取体重、肾重、计算肾肥大指数（肾重/体重）,检测尿白蛋白排泄率（UAER）;测定各组生化指标包括血糖（BG）、胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、血清肌酐（SCr）、血尿素氮（BUN）;检测肾组织中丙二醛（MDA）的含量及超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）与谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性;肾组织切片行PAS染色分析肾小球面积及肾小球体积。结果 DM组大鼠肾重、肾重/体重、UAER、TC、TG、SCr、BUN、肾小球面积、肾小球体积较NC组均明显增加,DP组上述改变较DM组均明显减轻（P〈0.05）。DP组肾组织中MDA含量明显低于DM组,SOD、CAT、GSH-Px活性明显高于DM组（P〈0.05）。结论普罗布考可能部分通过减轻肾组织氧化应激反应实现对糖尿病大鼠肾脏的保护作用。     

前列地尔联合益肾化湿颗粒对糖尿病肾病患者血糖、血脂、肾功能以及尿足细胞相关蛋白的影响

目的:分析前列地尔联合益肾化湿颗粒对糖尿病肾病患者血糖、血脂、肾功能以及尿足细胞相关蛋白的影响。方法:98例糖尿病肾病患者按抽签法分为对照组与实验组,各49例,对照组予以前列地尔治疗,实验组基于对照组加用益肾化湿颗粒治疗,比较两组疗效,糖化血红蛋白(Hb A1c)、血糖(FPG)、餐后2 h血糖低(2h PG),甘油三脂(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C),血尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、β2微球蛋白(β2-MG)、胱抑素(Cys-C),尿足细胞标志蛋白(PCX)nephrin,安全性。结果:实验组总有效率高于对照组(P0.05)。治疗后,两组Hb Alc、FPG、2h PG比较无差异(P0.05)。实验组TG、TC、LDL-C、BUN、Cr、β2-MG、Cys-c、PCX、尿nephrin/尿Cr低于对照组(P0.05)。实验组HDL-C高于对照组(P0.05)。结论:前列地尔联合益肾化湿颗粒治疗对糖尿病肾病的疗效确切,可利于血糖、血脂、肾功能的改善,降低尿足细胞相关蛋白的浓度。     

不同剂量甲钴胺联合GM1治疗糖尿病周围神经病变疗效观察

目的:探讨不同剂量甲钴胺联合单唾液酸四己糖神经节苷脂(GM1)治疗糖尿病周围神经病变的疗效。方法:收取2013年3月至2016年3月我院收治的糖尿病周围神经病变患者116例作为研究对象,按照随机数字表法分为A、B组各58例。A组患者使用高剂量甲钴胺联合GM1治疗,B组患者使用常规剂量甲钴胺联合GM1治疗。对两组治疗效果、神经电生理、不良反应以及患者生活质量进行观察与比较。结果:A组患者治疗显效率和总有效率分别为63.79%和96.55%,显著高于B组的39.66%和84.48%,差异有统计学意义(P0.05)。治疗后两组患者腓神经及正中神经运动神经传导速度(MCV)以及感觉神经传导速度(SCV)均显著提高,与治疗前相比有显著差异,且A组变化幅度明显高于B组,差异有统计学意义(P0.05)。A组不良反应发生率为6.70%,B组为3.45%,两组相较差异不显著(P0.05)。治疗后A组生活质量得分高于B组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:高剂量甲钴胺联合GM1治疗糖尿病周围神经病变与常规剂量相比具有更好的疗效,有助于患者生活质量的提高,值得临床推广应用。     

口服降糖药和胰岛素对不同临床分期糖尿病视网膜病变病情进程的影响

目的:探讨降糖药物和胰岛素控制血糖对不同临床分期糖尿病视网膜病变进程的影响。方法:收集糖尿病伴有视网膜病变的患者78例。采用随机表法,将糖尿病视网膜病变患者分为药物控制血糖组和胰岛素控制组,药物治疗组38例,胰岛素治疗组40例,使血糖达到控制标准。评价干预前后患者血清C肽、糖化血红蛋白、胰岛素抵抗指数,以及糖尿病视网膜病变分级。结果:药物控制组治疗前后2 h CP、以及糖化血红蛋白测定差异无统计学意义(p0.05)。胰岛素组治疗前后,血清空腹C肽、2 h CP差异有统计学意义(p0.05);而糖化血红蛋白、胰岛素抵抗指数差异无统计学意义(p0.05)。药物组治疗前Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期、Ⅴ期、Ⅵ期病例数和治疗后相比,差异有统计学意义(p0.05),视网膜病变分级程度明显增高。胰岛素组治疗前Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期、Ⅴ期、Ⅵ期病例数和治疗后相比,差异有统计学意义(p0.05)。药物组和胰岛素组间视网膜病变分级差异无统计学意义(p0.05);治疗后差异有统计学意义(p0.05)。结论:胰岛素能够提高糖尿病患者血清C肽,降低胰岛素抵抗,和药物控制血糖相比,能够延缓糖尿病视网膜病变的进展。     

血糖波动对2 型糖尿病大鼠心肌组织形态的影响及机制研究

目的:观察血糖波动对2型糖尿病大鼠心肌组织形态的影响并探讨其可能机制。方法:选取45只雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠,按随机数字法分成正常对照组(CON组)和糖尿病组(DM组)。DM组给予4周高糖高脂饲料喂养后,予小剂量链脲佐菌素35 mg/Kg腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型。将成模大鼠按随机数字法分成糖尿病对照组(CDM组)和波动血糖组(FDM组)。FDM组大鼠每天定时皮下注射短效胰岛素并错时给予葡萄糖,建立糖尿病血糖波动模型,CON组、CDM组予等量生理盐水皮下注射。每周测血糖值2天,4次/天,动态观测各组大鼠外形、进食量、饮水量等变化。造模成功12周后取腹主动脉血测定糖化血红蛋白(Hb Alc),取大鼠心脏组织行Masson染色观察心肌纤维化水平,免疫印记法分别检测心肌组织AKT、p-AKT蛋白的表达,免疫组织化学法分析各组大鼠心肌细胞中Caspase-3蛋白的表达。结果:(1)与CON组相比,FDM组、CDM组大鼠Hb A1c、血糖变异系数(CV)水平升高,差异具有统计学意义(P0.05);与CDM组相比,FDM组Hb A1c水平差异无统计学意义(P0.05),CV值进一步升高,差异具有统计学意义(P0.05)。(2)与CON组相比,CDM组、FDM组大鼠心肌组织形心肌纤维化水平升高,差异具有统计学意义(P0.05);与CDM组相比,FDM组心肌组织心肌纤维化水平进一步升高,差异具有统计学意义(P0.05)。(3)与CON组相比,FDM组、CDM组大鼠心肌p-AKT蛋白表达水平均减少,差异具有统计学意义(P0.05);与CDM组相比,FDM组p-AKT蛋白表达水平均进一步减少,差异具有统计学意义(P0.05)。而三组大鼠心肌组织AKT蛋白表达水平差异无统计学意义(P0.05)。(4)与CON组相比,FDM组、CDM组大鼠心肌Caspase-3蛋白表达水平均升高,差异具有统计学意义(P0.05);与CDM组相比,FDM组Caspase-3蛋白表达水平进一步升高,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:血糖波动可加重2型糖尿病大鼠的心肌纤维化,其机制可能与抑制AKT活化有关。     

Plasmin reduces fibronectin deposition by mesangial cells in a protease-activated receptor-1 independent manner

BackgroundProtease-activated receptor-1 (PAR-1) potentiates diabetic nephropathy (DN) as evident from reduced kidney injury in diabetic PAR-1 deficient mice. Although thrombin is the prototypical PAR-1 agonist, anticoagulant treatment does not limit DN in experimental animal models suggesting that thrombin is not the endogenous PAR-1 agonist driving DN.ObjectivesTo identify the endogenous PAR-1 agonist potentiating diabetes-induced nephropathy.MethodsUnbiased protease expression profiling in glomeruli from human kidneys with DN was performed using publically available microarray data. The identified prime candidate PAR-1 agonist was subsequently analysed for PAR-1-dependent induction of fibrosis in vitro.ResultsOf the 553 proteases expressed in the human genome, 247 qualified as potential PAR-1 agonists of which 71 were significantly expressed above background in diabetic glomeruli. The recently identified PAR-1 agonist plasmin(ogen), together with its physiological activator tissue plasminogen activator, were among the highest expressed proteases. Plasmin did however not induce mesangial proliferation and/or fibronectin deposition in vitro. In a PAR-1 independent manner, plasmin even reduced fibronectin deposition.ConclusionExpression profiling identified plasmin as potential endogenous PAR-1 agonist driving DN. Instead of inducing fibronectin expression, plasmin however reduced mesangial fibronectin deposition in vitro. Therefore we conclude that plasmin may not be the endogenous PAR-1 agonist potentiating DN.     

Identification of new potent inhibitor of aldose reductase from Ocimum basilicum

Recent efforts to develop cure for chronic diabetic complications have led to the discovery of potent inhibitors against aldose reductase (AKR1B1, EC 1.1.1.21) whose role in diabetes is well-evident. In the present work, two new natural products were isolated from the ariel part of Ocimum basilicum; 7-(3-hydroxypropyl)-3-methyl-8-β-O-d-glucoside-2H-chromen-2-one (1) and E-4-(6′-hydroxyhex-3′-en-1-yl)phenyl propionate (2) and confirmed their structures with different spectroscopic techniques including NMR spectroscopy etc. The isolated compounds (1, 2) were evaluated for in vitro inhibitory activity against aldose reductase (AKR1B1) and aldehyde reductase (AKR1A1). The natural product (1) showed better inhibitory activity for AKR1B1 with IC₅₀ value of 2.095 ± 0.77 µM compare to standard sorbinil (IC₅₀ = 3.14 ± 0.02 µM). Moreover, the compound (1) also showed multifolds higher activity (IC₅₀ = 0.783 ± 0.07 µM) against AKR1A1 as compared to standard valproic acid (IC₅₀ = 57.4 ± 0.89 µM). However, the natural product (2) showed slightly lower activity for AKR1B1 (IC₅₀ = 4.324 ± 1.25 µM). Moreover, the molecular docking studies of the potent inhibitors were also performed to identify the putative binding modes within the active site of aldose/aldehyde reductases.     

葛根素对糖尿病心肌细胞的保护及其机制研究

观察葛根素（Puerarin）对链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）诱导的糖尿病大鼠心肌细胞的保护作用,并探讨血小板反应素1（Thrombospondin-1,TSP-1）的表达改变及其作用。雄性SD大鼠45只随机分为三组（n=15）：糖尿病组和葛根素治疗组采用一次腹腔注射链脲佐菌素（STZ）65mg／kg制备糖尿病模型,其中葛根素治疗组于造模后葛根素腹腔注射4周（100mg/kg/day）,正常对照组仅腹腔注射等量生理盐水（6ml／kg）,同样喂养4周。四周后各组大鼠处死。H—E染色及透射电子显微镜观察三组大鼠心肌细胞纤维显微结构和超微结构的病理改变．免疫组化和实时荧光定量PCR法观察大鼠心肌细胞中TSP-1蛋白和mRNA表达的变化．同时利用Langendorff离体心脏灌流法测定各组大鼠心室肌细胞功能。结果发现葛根素治疗组较糖尿病组大鼠的体重增加明显,同时血糖下降,有显著性差异（P〈0．01）。H—E染色显示糖尿病大鼠多处心肌肌丝紊乱伴少量炎症细胞浸润,电镜下发现有线粒体嵴消失溶解,肌丝排列紊乱等病理改变,而葛根素治疗组大鼠偶见上述病理变化。免疫组化显示葛根素治疗组心肌内TSP-1阳性细胞密度小于糖尿病大鼠,TSP-1 mRNA表达也比糖尿病大鼠要低。此外葛根素治疗组大鼠的左室收缩末压（LVSEP）、左心室舒张末期压（LVEDP）等心功能指标均明显低于正常组（P〈0．01）,但较糖尿病组有显著改善（P〈0．01）。上述结果显示葛根素能保护糖尿病大鼠心肌细胞的高糖损伤和维持心室肌细胞的功能,而该机制可能与抑制心肌细胞TSP-1表达的水平有关。